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蛋白芯片定制檢測服務實驗操作流程

實驗技術簡介:

蛋白芯片是一種高通量監(jiān)測系統(tǒng)，通過靶分子和捕捉分子相互作用來監(jiān)測蛋白分子之間的相互作用。捕獲分子--般都預固定在芯片表面，由于抗體的高度特異性和與抗原強結(jié)合特性所以被廣泛的用做捕獲分子。對于研究蛋白芯片的研究在芯片表面有效固定抗體是非常關鍵的，特別是在固定抗體-致性方面非常關鍵對于增強蛋白芯片的靈敏度。G蛋白是一種抗體結(jié)合蛋白, 他特意結(jié)合抗體FC片段,因此已被廣泛的用于固定不同類型的抗體。

實驗技術原理:

蛋白芯片技術的基本原理是將各種蛋白質(zhì)有序地固定于濾膜、載玻片等各種載體上成為檢測用的芯片。然后，用標記了特定熒光素的抗體或其他成分與芯片反應，經(jīng)清洗將未能與芯片上的蛋白質(zhì)互補結(jié)臺的成分洗去，再利用熒光掃描儀或激光共聚焦掃描技術，測定芯片上各點的熒光強度，通過熒光強度分析芯片上成分與待檢溶液中成分之間相互作用的關系，由此達到測定目的。

實驗操作流程: .

1、客戶提供生物樣品(抗原或者抗體),驗收。

2、配制點樣液，使用Smartarrayer點樣儀進行點樣。

3、芯片固定，若無后續(xù)實驗，芯片交付客戶。

4、芯片反應實驗。

5、芯片掃描及數(shù)據(jù)分析。芯片清洗后，用LuxScan 10K-A Cy3通道掃描，并提取數(shù)據(jù)進行分析。

6、提供結(jié)果報告(包括雜交圖片、數(shù)據(jù)結(jié)果及相應聚類和差異分析等結(jié)果)。

客戶提供:

1、實驗對象為組織樣品，取適量(50-100mg) 新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品，使用

BioPulverizerTM冰凍粉碎組織，加1m的RNA抽提試劑TRIzol (Invitrogen) ,使用Mini-Bead-Beater-16勻漿后抽提RNA。

2、實驗對象為細胞樣品，每份樣品取1x106~ 1x107細胞，加1m的RNA抽提試劑TRIzol (樣品為貼壁細胞，每10cm2培養(yǎng)皿TRIz0I使用量為1ml)，裂解后抽提RNA。

交付標準:

1、芯片檢測數(shù)據(jù)

2、完整的實驗操作規(guī)程、實驗報告(含軟件分析結(jié)果)以及實驗材料

實驗代做服務：